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南京试管代孕身份确认|做试管婴儿夫妻应该注意啥?

时间:2023-03-19 03:53  来源:未知  阅读次数:524

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病原性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附于细菌表面,生成凝块,因而具有抗吞噬的作用。凝固酶试验对于判定该菌株是否具有致病力,很有帮助。葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。

葡萄球菌所产生的凝固酶有以下两种:

结合凝固酶(即凝聚因子):是一种结合于菌体细胞壁的酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使之变成纤维蛋白,而使葡萄球菌凝集成块,玻片法阳性结果是由此酶(凝聚因子)所致。

游离凝固酶:是凝血酶原样物质,不直接作用于血浆纤维蛋白原上,而被血浆中的致活剂(即凝固酶致活因子)激活后,变成耐热的凝血酶样物质,此物质可使血浆中的液态纤维蛋白原变为固态纤维蛋白,从而使血浆凝固。试管法的阳性结果为此酶所致。

血浆凝固酶试验方法

玻片法:

在1张洁净玻片中央加1滴9g/L氯化钠(生理盐水)溶液,用接种环取待检培养物与其混合(设阳性和阴性对照) 制成菌悬液,若经10~20s 内无自凝现象发生,则加入兔新鲜血浆1环,与菌悬液混合,观察结果。5~10s内出现凝集者为阳性。

试管法:

用生理盐水将新鲜兔血浆4倍稀释,取0.5 ml于试管再加0.5ml待测菌浓菌悬液(需做阳性对照及阴性对照。),混匀后置37℃水浴中,每30min观察1次结果。若3小时内试验管和阳性对照管出现凝固,阴性对照管(即浓菌液管)不凝固,为阳性;若阴性,继续观察到24小时,不凝固者为阴性。如有凝块或整管凝集出现为阳性。4h后无上述现象出现,则放置过夜后再观察。

(商品化)冻干血浆法:

每支西林瓶加入0.5mL灭菌生理盐水至完全溶解,然后加入葡萄球菌24h肉汤培养物0.3mL,充分混匀, 盖好西林瓶胶塞,置于36±1℃培养,在6h内定时观察结果。结果观察(如下图所示):倾斜或倒置试管时,呈现凝固块,或凝固块体积大于原体积的一半时,为血浆凝固酶阳性。观察结果时应避免用力振动西林瓶,以免凝块振碎。

血凝固酶实验

血浆凝固酶试验应用:

本试验仅用于致病性葡萄球菌的鉴定。

血浆凝固酶试验注意事项

玻片法:

10 秒内观察结果,如超过10 秒可出现假阳性,因此必须用试管法验证凝聚因子试验。 可选择的玻片凝集试验法还包括检测凝集因子和蛋白A的胶乳凝集试验。但胶乳凝集试验和玻片凝固酶试验的结果并不完全一致。

尽管胶乳凝集试验鉴定路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis)的可靠性较差,但鉴定金黄色葡萄球菌的特异性和灵敏性均高于传统的玻片凝固酶试验。有些腐生葡萄球菌和松鼠葡萄球菌及某些微球菌属的菌种可能胶乳凝集试验阳性,但玻片凝固酶试验通常阴性。

a. 试管法葡萄球菌凝固酶试验阳性者,应见到明显的纤维蛋白凝胶块,出现羊毛状或纤维状沉淀物并非真正凝固,应判为阴性。中间型葡萄球菌、猪葡萄球菌需要较长时间(4H以上)孵育,才可出现阳性。

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b. 如果培养时间超过4H,应考虑以下几点:

Ⅰ.延长培养时间后,有些菌株产生的葡萄球菌激酶(溶纤维蛋白酶),可以裂解凝块,产生假阴性结果;

Ⅱ.如果使用的血浆不是无菌的(或部分不是无菌的),假阳性和假阴性结果均有可能发生;

Ⅲ.所用待测菌不纯,延长培养时间后,污染菌可能导致假阳性结果。在这点上,含EDTA的血浆优于柠檬酸盐血浆,因为利用柠檬酸盐的细菌(如一些链球菌)可能通过消耗柠檬酸盐促进凝集发生。

Ⅳ.所用血浆缺乏纤维蛋白原(脱纤维血浆)。

试管法:

须制备浓厚的均匀菌悬液,以便观察结果。

最好用EDTA 抗凝的兔血浆,不主张用人的抗凝血,除非经过试验证实其中不含感染因子、没有凝血能力和没有抑制因子。不同种动物血浆因子不同,凝固状态也不同,兔血浆凝块结实,凝固速度快,优于人血浆。

试验不可在高盐培养基上的取菌落,因为可能出现自凝或假阳性。

若被检菌为陈旧的肉汤培养物(超过18~24H),或生长不良,凝固酶活性低的菌株可能检测不出来。

为防止玻片法检测的假阳性反应,必须严格按《全国临床检验操作规程》进行操作。当怀疑待测菌是金黄色葡萄球菌时,对玻片凝固酶阴性的结果应做试管法凝固酶试验确证。玻片法和试管法凝固酶试验的血浆标准是:必须含有足够浓度的凝固酶反应因子和纤维蛋白原,必须无溶纤维蛋白活性和无抑制剂。

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本试验应同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性的葡萄球菌的肉汤培养物作为对照。

商品化冻干血浆试剂需按照厂家提供的产品说明书使用及结果判读。

试管婴儿 ——— 对于饱受不孕不育困扰的夫妻来说,是个既熟悉又陌生的医学名词,一方面宣传普及让人们都对此有所耳闻,但另一方面,试管婴儿对于受孕夫妻的自身要求有哪些?术前有哪些准备事项?

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做试管婴儿受哪些条件制约?

随着体外受精与胚胎移植技术的成熟,很多不孕不育的患者都将希望寄托于此。但试管婴儿同时也受到一些条件的制约,请问制约因素是什么?通过什么方式可以避免这些因素的阻挠?

不孕症发生率随着女性年龄增加而逐渐升高。首先年龄会影响到卵子的质量。正常情况下,随着年龄增加,女性卵巢中的卵泡通过闭锁过程自发性、渐进性减少并耗竭,卵巢功能逐渐降低并衰竭,进而不孕。

年龄越大,剩余的生育功能正常的卵子数量就越少。目前众多研究显示女性生育力从 30 ~ 35 岁就逐渐降低; 40 岁以后急剧下降。而且每个人的生育力存在极大的个体差异,一部分年轻人卵巢功能已经衰竭,无法怀孕。

临床资料表明,随着年龄增大,试管婴儿治疗周期获得的卵子数目和高质量卵子减少,胚胎质量降低,临床妊娠率降低,自然流产及胎儿畸形发生风险增加。其次,随年龄增加,子宫内膜在形态和功能上均发生一系列改变,可能导致子宫内膜容受性 ( 内膜对胚胎的接受能力 ) 明显降低,进而引起试管婴儿治疗周期中胚胎着床失败及流产。此外,随着年龄增加,尤其是 35 岁以后,妊娠及分娩并发症发生风险增加,如妊娠高血压病、妊娠糖尿病、产后失血等也增加。

女性尤其应该避免不必要的人工流产,人工流产前最好咨询医生,评估今后发生不孕症的风险,有的女性人工流产后再次妊娠非常困难,甚至失去做母亲的机会。自然流产连续发生 2 次或 2 次以上称为复发性流产,以往称为习惯性流产。很多夫妇急于想要孩子不做检查,这样很容易再次自然流产,从而延误了更多的时间。

做试管婴儿前男女需做哪些检查?

在确定可以做试管婴儿之前,是否男方与女方都要接受检查?检查前有什么准备工作需要做吗?检查的主要项目有哪些?这些检查的主要目的又是什么呢?

试管婴儿前男女双方的检查是必不可少的,其目的是进一步确定是否有试管婴儿的指征,适合做何种试管婴儿,即常规试管婴儿,俗称第一代试管婴儿,或单精子显微注射,俗称第二代试管婴儿,排除试管婴儿的禁忌症。同时也是为了解、及早发现影响妊娠甚至分娩的不利因素,如卵巢的囊肿、子宫内膜息肉等,及时治疗,以提高妊娠率,降低妊娠及分娩并发症。此外,还要排除部分遗传因素对后代的可能影响。当然,很重要的一点是了解卵巢功能,制定恰当的促排卵方案。检查前一般不需特别准备,但有的项目受时间限制,如女性的基础内分泌检查一般需在月经第 2 天进行,而且最好在 3 个月内未服用过影响内分泌的药物,子宫输卵管造影及宫腔镜检查一般需要月经干净后 3 ~ 7 天,在月经干净后需禁性生活,男性的精液常规需在禁性生活 3 ~ 7 天检查,其他项目对时间要求不严格。

试管婴儿过程中有哪些注意事项?

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在接受试管婴儿的过程中,夫妻双方又应该注意些什么呢?

接受试管婴儿治疗期间保持正常的饮食和起居即可,不需大养大补,当然,应避免过于劳累及熬夜。在开始促排卵一周后至胚胎移植后一周期间避免性生活,其他时间可以保持正常的性生活,适当的性生活可以缓解夫妇的紧张情绪,有利于妊娠。

促排卵治疗过程中及取卵后少数女性会感觉食欲不好,甚至恶心、呕吐、腹泻,应及时与医护人员沟通,了解是否发生卵巢过度刺激综合征,在医护人员指导下合理进饮食,必要时补液治疗,个别女性取卵后胃里难受、肚子不舒服、肚子疼或肚子胀等等,可以少食多餐,进食容易消化的食物,适当增加高蛋白流质,如牛奶、豆浆、米粥等,也可以喝一些运动饮料,注意尿量变化,如果症状严重或尿量少,应及时就诊。再有,取卵后应适当休息,避免剧烈活动,不过取卵及胚胎移植后也不要长时间卧床或保持一个体位,这样不利于血液循环,妊娠率降低,血栓发生风险也会增加。

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